烏藥不同提取物對(duì)小鼠胃腸運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)討論論文
烏藥為樟科山胡椒屬植物烏藥Lindera aggregata (Sims)Kosterm.的膨大塊根，具有溫中散寒、理氣止痛的功效。史書(shū)有載烏藥可治“惡心腹痛，宿食不消……”，臨床上常與多種中藥配伍，治療寒凝氣滯所致的脘腹疼痛�，F(xiàn)代藥理研究表明烏藥具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗氧化、調(diào)節(jié)平滑肌等廣泛的藥理活性。為明確其對(duì)胃腸道的調(diào)節(jié)功能，本課題初步探討烏藥不同提取液對(duì)消化系統(tǒng)方面的影響。
1 材料與方法
1.1 動(dòng)物健康KM小鼠，清潔級(jí)，體重18-22 g，雌雄各半，長(zhǎng)沙市開(kāi)福區(qū)東創(chuàng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技服務(wù)部代購(gòu)，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(湘)2009-0012。
1.2 藥物烏藥購(gòu)于湖南岳陽(yáng)醫(yī)藥總公司中藥飲片加工廠長(zhǎng)沙經(jīng)營(yíng)部，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室鑒定為樟科植物烏藥Lindera aggregate(Sims)Kosterm.的干燥塊根。取烏藥200 g，加5倍量水，經(jīng)揮發(fā)油提取器提取12 h，得揮發(fā)油0.5 mL保存;藥液，過(guò)濾，濾渣煎煮1次，過(guò)濾，合并兩次濾液，最后濃縮成1 g生藥/mL的藥液。濾渣加75%乙醇回流，得浸膏1.5 g，置冰箱內(nèi)供實(shí)驗(yàn)備用。甲硫酸新斯的明注射液(浙江仙琚制藥股份有限公司，批號(hào)：120102)，硫酸阿托品注射液(浙江金力制藥有限公司，批號(hào)：20130102)。
1.3 樣品處理?yè)]發(fā)油加5%吐溫-80乳化，乙醇提取物配置時(shí)加適量二甲基亞砜。助溶劑量藥效試驗(yàn)不干擾藥理活性。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn);多組計(jì)量資料采用one-way ANOVA。
2 結(jié)果
2.1 烏藥不同提取物對(duì)新斯的明引起的小腸推進(jìn)亢進(jìn)的影響小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為6組，每組10只。分別為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、阿托品組(0.3 mg/kg)、烏藥水提取物組(0.948 g/kg)、烏藥醇提取物組(0.074 g/kg)、烏藥揮發(fā)油提取物組(5.8 μL/kg)，各組分別給予相應(yīng)藥物，1次/d，連續(xù)3 d，對(duì)照組給予等容積蒸餾水。實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物禁食12 h，自由飲水末次給藥后1 d，各組動(dòng)物按0.5 mL/kg皮下注射新斯的明(0.5 g/L，0.25 mg/kg)，正常對(duì)照組皮下注射生理鹽水，20 min后各組動(dòng)物灌服5%炭末生理鹽水混懸液0.2 mL/10g，灌服炭末生理鹽水混懸液20 min將小鼠頸椎脫臼法致死，打開(kāi)腹腔剪取幽門(mén)至回盲部的腸管，不加牽引平鋪于托盤(pán)上，測(cè)量小腸全長(zhǎng)及炭末在腸內(nèi)推進(jìn)的距離，計(jì)算炭末推進(jìn)百分率。
模型對(duì)照組和正常對(duì)照組小腸推進(jìn)率之差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示模型對(duì)照組動(dòng)物小腸推進(jìn)率高于正常組，說(shuō)明造模成功。而3個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間該項(xiàng)指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，烏藥不同提取物對(duì)新斯的明引起的小腸推進(jìn)亢進(jìn)的影響作用相近。
2.2 烏藥不同提取物對(duì)阿托品引起的小腸推進(jìn)抑制的影響
小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為5組，每組10只。分別為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、烏藥水提取物組(0.948 g/kg)、烏藥醇提取物組(0.074 g/kg)、烏藥揮發(fā)油提取物組(5.8 μL/kg)。第4天給藥后40min，除正常對(duì)照組外，剩余4組均腹腔注射阿托品0.3mg/kg，20 min后各組動(dòng)物灌服5%炭末生理鹽水混懸液0.2 mL/10 g，灌服炭末生理鹽水混懸液20 min將小鼠頸椎脫臼法致死，打開(kāi)腹腔剪取幽門(mén)至回盲部的.腸管，不加牽引平鋪于托盤(pán)上，測(cè)量小腸全長(zhǎng)及炭末在腸內(nèi)推進(jìn)的距離，計(jì)算炭末推進(jìn)百分率。
模型對(duì)照組和正常對(duì)照組小腸推進(jìn)率之差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示模型對(duì)照組動(dòng)物小腸推進(jìn)率高于正常組，說(shuō)明造模成功。而3個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間該項(xiàng)指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示烏藥不同提取物對(duì)阿托品引起的小腸推進(jìn)抑制的影響作用相近。
3 討論
胃腸道疾病在世界范圍內(nèi)都是發(fā)病率較高的疾病之一，其中以胃腸道蠕動(dòng)障礙尤為多見(jiàn)，胃腸道蠕動(dòng)障礙具有反復(fù)性和多發(fā)性不同程度的影響患者的生活質(zhì)量。促進(jìn)胃腸道的蠕動(dòng)，增強(qiáng)腸道收縮，有利于對(duì)抗患者術(shù)后胃腸道麻醉性功能障礙，胃腸道的功能恢復(fù)影響患者的整體康復(fù)質(zhì)量。
烏藥作為重要的溫胃理氣止痛藥之一，主要含有揮發(fā)油、異喹啉類(lèi)、生物堿及呋喃倍半萜3大類(lèi)成分，現(xiàn)代藥理表明其具有良好的鎮(zhèn)痛、消炎、擴(kuò)張血管、抗疲勞等作用。文獻(xiàn)報(bào)道烏藥對(duì)胃腸平滑肌既有促進(jìn)腸蠕動(dòng)增強(qiáng)腸收縮的功效，又能抑制胃腸平滑肌，緩解其痙攣。據(jù)臨床試驗(yàn)表明烏藥有促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)功能的作用，能明顯改善消化不良者的臨床癥狀。課題組前期對(duì)烏藥不同提取物劑量進(jìn)行了篩選，試驗(yàn)表明各提取物的高劑量促進(jìn)正常小鼠的炭末推進(jìn)作用最強(qiáng)，因此，本實(shí)驗(yàn)以為考察劑量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明烏藥不同提取物對(duì)新斯的明致的小鼠小腸推進(jìn)功能亢進(jìn)有一定抑制作用，對(duì)阿托品致的小鼠小腸推進(jìn)功能抑制有一定促進(jìn)作用，具有雙向調(diào)節(jié)作用。此次研究可為藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)提供依據(jù)，也為烏藥的臨床應(yīng)用及其多層次的開(kāi)發(fā)利用奠定了一定的基礎(chǔ)。但對(duì)烏藥理氣止痛物質(zhì)基礎(chǔ)方面的研究，應(yīng)當(dāng)綜合化學(xué)、藥理等多學(xué)科技術(shù)對(duì)烏藥進(jìn)一步的進(jìn)行系統(tǒng)研究。
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