黃酮類化合物的提取與分離方法綜述論文
黃酮類化合物提取分離
黃酮苷類化合物多存在于植物的花、葉、果等組織中,一般可用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、水或某些極性較大的混合溶劑進行提取,其中用得最多的是甲醇—水(1∶1)或甲醇。一些多糖苷類則可以用沸水提取。常用的提取方法有:煎煮法、冷浸法、回流、滲漉等經典方法。劉氏[1]對銀杏葉總黃酮水浸提法作了研究,采取正交設計實驗,確定了最佳水浸提條件。煎煮法常用的溶劑為水,煎煮次數為2~3次;冷浸常用溶劑為95%乙醇、甲醇和水。郭氏[2]運用超聲技術提取黃酮苷是目前比較新的提取方法,此方法大大縮短了提取時間,提高了有效成分的提出率及藥材的利用率。
分離純化
黃酮苷類的分離方法主要用各種柱層析法。
①聚酰胺柱層析法:聚酰胺對各種黃酮苷類有較好的分離效果,其層析容量較大,適合于制備性分離,洗脫劑常用水—甲醇,也有用水—乙醇和甲醇—氯仿。
、诠枘z柱層析法:此法的'應用范圍最廣,不僅可以分離黃酮苷,也可以分離各種黃酮苷元。
③葡聚糖凝膠柱層析:它主要靠分子篩作用分離黃酮苷類,在洗脫時,一般按分子量的大小順序洗出柱體。李氏等[3]從夏至草乙醇提取物的乙酸乙酯部位中,利用Sephadex柱色譜從中分離出2個黃酮類化合物。楊氏等[4]利用Sephadex LH—20柱色譜對分蘗蔥頭進行分離純化,分得4個黃酮苷類化合物,其中一個為新的黃酮類化合物。
研究結果表明,AB—8樹脂較宜于葛根黃酮的提純,經AB—8樹脂吸附分離后,提取物中黃酮含量提高近1倍。⑤HPLC法:應用HPLC法分離黃酮苷類化合物的報道較多。鄔氏等[8]對18種黃酮及黃酮苷類化合物在C8、C18和CN 3種固定相上的梯度洗脫、RP—HPLC法分離做了研究,結果表明,C18柱基本可以對植物黃酮苷元和配基實現分離,但對極性大的苷部分洗脫出慢峰,總洗脫時間增長和分離效果不太理想,而C8填料極性介于C18和CN二者之間,因而對黃酮苷類的分離比較理想,峰形和分離度也最好。
還有離心薄層層析法、制備性薄層層析法、紙層析法和超臨界流體色譜分離等。黃酮的提取分離,精制純化常用此技術。曹氏等[6]在研究大孔樹脂吸附純化沙棘籽渣總黃酮的條件及參數中,發(fā)現2101大孔樹脂對沙棘籽渣總黃酮的吸附性能最好。潘氏等[7]選擇10種大孔吸附樹脂,比較其對葛根黃酮的吸附率與解吸率,篩選較優(yōu)的葛根黃酮吸附劑。
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